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PCR实验室风淋室与净化设备要求

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PCR实验室风淋室与净化设备要求:
实验室净化设备,比如臭氧、紫外线灯、风淋室(包括货淋室)、传递窗、超净工作台FFU高效送风口、互联锁等净化辅助设备。空气过滤系统,有初效过滤器、中效过滤器、高效过滤器等。PCR实验室传递窗安装特点

PCR实验室有哪些净化要求?
分类:实验室家具
一、PCR实验(experiment)室并没有严格的净化要求,但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能(maybe)性,宜采用全送全排的气流组织形式。实验室净化由于洁净实验室-生物安全实验室内操作对象是危险性的微生物,对人体、动植物或环境具有危害,必须通过采用合理的空气调节系统,保持洁净实验室-生物安全实验室的相对负压环境无论何时都不被破坏,以保证实验室内危险性微生物不能向外部环境中扩散。同时,要严格控制(control)送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。
2.1试剂贮存和准备区

二、实验(experiment)区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。试剂和用于样品制作的材料应直接运送至该区,不得经过其他区域。试剂原料(raw material)必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。 对与气流压力的控制(control),本区并没有严格的要求。

标本制备区

试剂贮存和准备区

标本制备区

扩增反应混合物配制和扩增区

缓冲区

传递窗
扩增反应混合物配制和扩增区

三、本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染,应尽量减少在本区内的不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。

四、该区域主要进行的操作为扩增片段的测定。净化实验室必须控制实验室的洁净度,对新风进行过滤,使实验室达到一定的净化要求。其中排风系统是重点,对于保证实验室相对负压环境和有效过滤室内污染排风起着重要的作用。风淋室

PCR实验室设计建设中容易出现的问题(实验室家具):
1、PCR实验室的空气流向必须严格按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区空气压力逐渐递减方式进行,防止扩增产物顺空气气流进入扩增前的区域。需要严格的通风设计,若通风设计不合理,会使风速流向混乱,甚至危害人们健康。

2、人流路径与物流路径设计不合理:
进入实验室区域工作人员应该按照以下路径:公共清洁区——更衣间(更换洁净服)——缓冲间——风淋室——污染实验区。
工作人员退出实验室的路径为:污染试验区——缓冲间——风淋室(有条件的可设置)——更衣间——公共清洁区

PCR实验室污染方式及处理(实验室家具)
分类: 实验室家具
有实验室的地方,就不可避免的会出现实验室污染。实验室的污染,不仅会影响实验与科研的质量和效果,还对实验室工作人员的身体健康有损害,PCR实验室的污染原因及解决方法。

PCR实验室污染
标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染。

PCR试剂的污染:主要是由于在PCR试剂配制过程中,由于加样枪、容器、双蒸水及其它溶液被PCR核酸模板污染。
PCR扩增产物污染:这是PCR反应中最主要最常见的污染问题。因为PCR产物拷贝量大,远远高于PCR检测数个拷贝的极限,所以极微量的PCR产物污染,就可造成假阳就可形成假阳性。

还有一种容易忽视,最可能造成PCR产物污染的形式是气溶胶污染;在空气与液体面摩擦时就可形成气溶胶,在操作时比较剧烈地摇动反应管,开盖时、吸样时及污染进样枪的反复吸样都可形成气溶胶而污染。实验室家具

实验室中克隆质粒的污染:在分子生物学实验室及某些用克隆质粒做阳性对照的检验室,这个问题也比较常见,因为克隆质粒在单位容积内含量相当高,另外在纯化过程中需用较多的用具及试剂,而且在活细胞内的质粒,由于活细胞的生长繁殖的简便性及具有很强的生命力,其污染可能性也很大。

PCR实验室设计方案
分类: 实验室装修
1、主体结构:
主体为彩钢板、铝(Al)合金(熔点660)型材。室内所有阴角、阳角均采用铝合金

50内圆角铝(Al),从而解决容易污染、积尘、不易清扫等问题。结构牢固,线条简明,美观大方,密封性好。

2、标准的四区分隔和气压调节:
将PCR过程分成试剂准备、标本制备和PCR扩增,产物分析(Analyse)四个独立的实验(experiment)区。净化实验室控制系统是整个洁净实验室安全运行的神经中枢,由于洁净实验室-生物安全实验室的实验对象是危险性的微生物,出于严格控制污染的原则,它要求以最少的维护人员,运用最优化的管理维护手段,来实时监控每一个实验室中设备所处的物理环境,保证实验室运行过程中始终处于相对负压环境,防止危险性微生物外泄。整个区域有一个整体缓冲走廊。每个独立实验区设置有缓冲区,同时各区通过气压调节,使整个PCR实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低(reduce)扩增产物对人员和环境的污染。

可打开缓冲区,缓冲区和 PCR 扩增区的排风扇往外排气,在实验(experiment)区的外墙上和各扇门上都安装有风量(定义:单位时间内空气的流通量)可调的回风口,空气通过回风口向室内换气。

3、消毒:
在三个实验(experiment)区和三个缓冲区顶部以及传送窗内部安装有紫外灯,供消毒用。洁净实验室无菌试验室、生物安全实验室必须保证人身安全、环境安全、废弃物安全和样本安全,能长期而安全地运行,同时还为需要实验室工作人员提供一个舒适、而良好的工作环境。

在试剂准备区和标本制备区还设置移动紫外线(Ultraviolet rays)灯,对实验(experiment)桌进行局部(part)消毒。

4、不锈钢(不锈耐酸钢)传递(transmission)窗:
试剂和标本通过机械连锁不锈钢(不建议使用电子连锁方式)传递窗传递,保证试剂和标本在传递过程中不受污染(人物分流)。

5、地面
地面建议使用聚氯乙烯(Polyvinyl chloride)卷材地面或自流坪地面,整体性好。便于进行清扫,耐腐蚀(释义:指腐烂、消失、侵蚀等)。